50 ml 離心管在離心時的最高轉速都低于12000rpm，赫西儀器出產的3H系列高速冷凍離心機特別配置了新型的專用于組織培養(yǎng)管的高速轉頭，并專門定制了高強度的50ml 錐底管。用這種轉頭分離細胞器，離心時間短，分離效果好。
設備：赫西3H系列冷凍高速離心機，6×50ml高速轉頭， 50 ml 離心管。
臺式高速冷凍離心機3H20RI
操作步驟：
1．成年鼠肝勻漿2000xg（約4000rpm） 離心15分，4℃（6×50ml高速轉頭）
2．沉淀用1mM NaHCO3 稀釋再在4000rpm離心15分，4℃
3．沉淀按濕重1g/ml NaHCO3 稀釋后配成68％蔗糖液，置于離心管下部，上部用42％蔗糖液
4．6×50ml高速轉頭，42200xg（18000rpm），4℃離心90分鐘，加速“5”減速“5”
5．離心后，粗制細胞膜在42％與68％蔗糖液之間形成
6．粗制細胞膜吸出后，用1mM NaHCO3 稀釋后，再以2000xg（約4000rpm）4℃離心30分，重復二次
7．去除上清液沉淀，再用1mM NaHCO3 稀釋，在50ml 離心管中，從底部依次向上鋪設：68％蔗糖液（稀釋樣品配成）、48％蔗糖液、42％蔗糖液。
8．鋪好后再次離心，6×50ml高速轉頭，18000rpm，4℃，90分鐘，加速“5”減速“5”
9．離心結束后可以看出細胞膜分布在42％與48％蔗糖液之間
成果：階梯形蔗糖梯度在50ml 離心管中用高速冷凍離心機分離亞細胞構造（膜、線粒體、溶酶體、高爾基復合體、微體等），由于開發(fā)了高強度的組培養(yǎng)管而變得更為可行。
通過上例，我們可以選擇不同的蔗糖階梯度來分離細胞器，可以得到相當高的純度。除了蔗糖梯度以外，用Percoll及Nycodenz 的自形成、予形成或階梯梯度分離亞細胞構造，近年來被廣泛應用。
- 上一篇：離心技術縱橫談
- 下一篇：如何安全使用離心機？
- 相關鏈接：
- 高速離心機與高速冷凍離心機的區(qū)別
- 高速冷凍離心機操作流程和特點
- 低速冷凍離心機和高速冷凍離心機區(qū)別
- 高速冷凍離心機主要用途及實驗時參考轉速
- 高速冷凍離心機及應用領域
- 醫(yī)用高速冷凍離心機的工作原理和用途
- 冷凍離心機分類和高速冷凍離心機特點
- 高速冷凍離心機關鍵材料的開發(fā)及成套技術應用通過驗收
- 兩款微量高速冷凍離心機橫向對比
- 智能高速冷凍離心機產品標準編制說明
